Wacker Simultanfärbungen mit Rhodamin B

Für die hier gezeigten Färbungen wurden neben dem Rhodamin B die Blaukomponte Alcianblau und Astrablau genommen und jeweils das Acriflavin mit einem Anteil von 1%, 0,5% und 0,2% variiert.

Es wurden Zweigquerschnitte von der Gewöhnlichen Robinie (Robinia pseudoacacia) gefärbt, die so zu Dauerpäpaten präpariert wurden: Zuerst wurden Zweigstücke in AFE fixiert. AFE ist eine Fixierlösung, abgestimmt auf botanisches Material und setzt sich zusammen aus 90 Teile 70% Ethanol, 5 Teile 35% Formaldehydlösung und 5 Teile 100% Essigsäure. Die fixierten Stücke können in 70% Ethanol aufbewahrt werden.
Die dann angefertigten Querschnitte sind ca. 40 µm dick. Verschiedene Schnitte wurden in den Wacker-Simultanfarblösungen jeweils für 12 Minuten gefärbt und anschließend in Wasser von überflüssiger Farbe gewaschen, in 70% Ethanol differenziert und mit 100% Isopropylalkohol entwässert. Der Einschluss zur Erstellung von Dauerpärparaten erfolgte mit Euparal.

Die Wacker-Simultanfärbung werden aus Stammlösungen mit Rhodamin B, Acriflavin und Alcianblau, bzw. für die zweite Variante mit Astrablau (statt Alcianblau) gemischt.

Hier die Färbungen mit Alcianblau, die Stammlösung des Acriflavins muss für die jeweiligen Stufen entsprechend verdünnt werden.

1 Teil 1%ige Rhodamin B-Lösung +
1 Teil 1%ige Acriflavinlösung+
10 Teile 0,2%ige Alcianblaulösung

Für diese Färbung wurde der Anteil Alcianblau erhöht. In der Regel werden 4 Teile genommen, hier sind es 10 Teile.

1 Teil 1%ige Rhodamin B-Lösung +
1 Teil 0,5%ige Acriflavinlösung +
4 Teile 0,2%ige Alcianblaulösung

1 Teil 1%ige Rhodamin B-Lösung +
1 Teil 0,2%ige Acriflavinlösung +
4 Teile 0,2%ige Alcianblaulösung

Hier die Färbungen mit Astrablau, die Stammlösung des Acriflavins muss für die jeweiligen Stufen wieder entsprechend verdünnt werden.

1 Teil 1%ige Rhodamin B-Lösung +
1 Teil 1%ige Acriflavinlösung +
2 Teile 0,5%ige Astrablaulösung +
2 Teile dest. Wasser 

1 Teil 1%ige Rhodamin B-Lösung +
1 Teil 0,5%ige Acriflavinlösung +
2 Teile 0,5%ige Astrablaulösung +
2 Teile dest. Wasser

1 Teil 1%ige Rhodamin B-Lösung +
1 Teil 0,2%ige Acriflavinlösung +
2 Teile 0,5%ige Astrablaulösung +
2 Teile dest. Wasser

Das Acriflavin färbt in allen Bereichen, d.h. es beeinflusst die Farbwirkung von lignifizierten Zellwänden ins rot bzw. orange und nicht-lignifizierten Zellwänden ins grün bzw. blaugrün. Je nach beigemischter Menge können sehr verschiedene Farbeindrücke erzielt werden.
Aber wie immer gilt: auch das jeweilige Probenmaterial und die verwendete Fixierung haben starken Einfluss auf die jeweilige Ausprägung der Färbung.