Glossar

Hier finden Sie kurze Erläuterungen zu den auf den Seiten des MKB verwen- deten Fachbegriffen aus der Welt der Mikroskopie.

Dreifachfärbungen auf der Basis des Farbstoffes Brillantkresylblau (BKB) zur Färbung botanischer Schnittpräparate. Die weiteren Komponenten der AcriBEN-Färbung sind Acriflavin (ein gelber Farbstoff) und Eosin. Die Färbung mit Eosin erfolgt in Nelkenöl. In der AcriBER-Färbung ist das Eosin durch Erythrosin ersetzt, auf das Nelkenöl kann bei dieser Variante verzichtet werden. Die Färbungen wurde 2009 von Jörg Weiß erstmalig im Mikroskopie-Forum von Christian Linkenheld vorgestellt.

AcriBEN Beispielbild vom Lavendelspross im Querschnitt:

Als Blastula oder Blasenkeim bezeichnet man ein frühes Embryonalstadium vielzelliger Tiere. Aus dem kugeligen Zellhaufen (Morula) entwickelt sich vor der Differenzierung der einzelnen Zelltypen eine kugel- oder blasenartige Form mit einem inneren, flüssigkeitsgefüllten Hohlraum.

Brillantkresylblau ist ein Diaminobenzooxazin-Farbstoff, der in wässriger Lösung über einen Stickstoffkomplex aktive Farbstoffanteile mit positiver Ladung bildet und Zellbestandteile, die negative Ladung tragen, bläulich anfärbt. Die Färbung ist nach Differenzierung selektiv bezüglich lignifizierter (verholzter) Zellbestandteile.

BKB dient in der Botanik neben Methylenblau zur Anfärbung von Torfmoosen und ist einer der Komponenten der AcriBEN-Färbung. Eine Standardanwendung in der Zoologie ist die Vitalfärbungen.
Beispiel einer reinen BKB-Färbung: Leitbündel eines Ginkgo-Blattstiels:


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Die Chloroplasten sind Organellen in den Zellen von Grünalgen und höheren Pflanzen, in denen die pflanzliche Energiegewinnung - die Photosynthese - abläuft. Ihre charakteristische grüne Farbe (aus dem Griechischen von chloros - grün) erhalten sie durch das eingelagerte Chlorophyll, den grünen Pflanzenfarbstoff.
Chloroplasten besitzen sowohl eine eigene DNA als auch eigene Ribosomen und zwei Biomembranen als Hülle und ähneln somit vom Aufbau her einer Blaualge. Nach heutigem Stand der Forschung haben sie sich aus endosymbiontischen Bakterien entwickelt - Endosymbiontentheorie.

Die Chromosomen (von gr. "chroma" Farbe und "soma" Körper) liegen im Zellkern tierischer und pflanzlicher Zellen. Sie enthalten, verpackt in Proteine, die Erbsubstanz (DNA) der Zelle. Die Anzahl der Chromosomen pro Zelle unterscheidet sich dabei von Lebewesen zu Lebewesen. Bei den Säugetiere liegt sie zwischen 18 beim Opossum und 80 beim Koboldmaki. Der Mensch hat 46 Chromosomen. Der Champignon (Agaricus campestris) hat mit 8 Chromosomen einen recht kleinen, die Natternzunge (Ophioglossum vulgatum) mit 480 einen sehr großen Chromosomensatz.
Die Größe der Chromosomen ist sehr unterschiedlich. Auch Riesenchromosomen kommen vor, diese (Polytänchromosomen z.B. bei den Zuckmückenlarven und Lampenbürstenchromosomen z.B. in den Hoden von Fruchtfliegen) können mit vergleichsweise geringen Aufwand präpariert und im Lichtmikroskop betrachtet werden. Der Durchmesser der Chromosomen beträgt in kondensiertem Zustand typisch zwischen 1 und 2 µm, bei Risenchromosomen um 10 µm. 

Diatomeen oder Kieselalgen verdanken ihren deutschen Namen ihrer Zellhülle aus Siliziumdioxid, dem Anhydrid der Kieselsäure. Diese Zellhülle (Frustel) besteht aus zwei Halbschalen, die schachtelförmig ineinander stecken. Dabei ist die innere Halbschale (Hypotheka) kleiner als die äußere (Epitheka). Form und Muster der Schalen bilden die Hauptbestimmungsmerkmale der ca. 6000 unterschiedlichen Arten.
Mikroskopische Dauerpräparate enthalten meist die aufwendig präparierten leeren Schalen der Diatomeen, von der lebenden Zelle ist dann nichts mehr vorhanden.

Dichroismus (vom lateinischen "di" = doppelt und vom griechischen "chrome" = Farbe, also Zweifarbigkeit) wird eine Eigenschaft von Mineralien bei Betrachtung aus verschiedenen Blickwinkeln verschiedene Farben zu zeigen genannt. Ursache ist die ungleiche Absorption des Lichtes bedingt durch die Kristallstruktur.
Dichroismus stellt wie Trichroismus eine Sonderform des Pleochroismus dar. Im Gegensatz zum Farbwechsel durch unterschiedliche Lichtarten (Alexandrieren, Tageslicht-Fluoreszenz) tritt die Zweifarbigkeit bei gleichbleibender Lichtart auf.
Die Erscheinung des Dichroismus zeigen viele gefärbte doppelbrechende Kristalle, sie ist in der Regel aber nur mit Hilfe eines besonderen Instrumentes, der dichroskopischen Lupe wahrzunehmen, die aus einem in eine Röhre gefassten Spaltungsstück von Doppelspat besteht, mit einer Lupe an der einen und einer viereckigen Öffnung an dem anderen Ende. Wegen der Doppelbrechung des Kalkspats sieht man den Ausschnitt doppelt und hält man einen dichroitischen Kristall davor, so erscheinen beide Bilder in verschiedener Farbe.
Zur genauen Bestimmung wird ein Gerät, das Dichroskop (oder Haidinger-Lupe) verwendet. Das Dichroskop findet in der Gemmologie häufig Anwendung und zeigt schnell und sicher, ob ein z.B. ein Schmuckstein anisotrop oder isotrop ist.
Nur optisch einachsige Kristalle (tetragonal, trigonal, hexagonal) zeigen Dichroismus. Rhombische, mono- und trikline Kristalle hingegen zeigen Trichroismus. Hängt mit der Tensoreigenschaft der Doppelbrechung zusammen.
Kubische Kristalle hingegen sind isotrop, die Lichtbrechung ist in allen Raumrichtungen gleich, daher gibt es keine Doppelbrechung. Solche Kristalle können folglich nicht pleochroitisch sein. Mögliche Doppelbrechungsphänomene an Granaten (Regenbogen-Andradit) sind auf Spannungen in den Kristallen herbeizuführen. Gleiches gilt für Glas und andere amorphe Substanzen.
Quelle: Mineralienatlas.de

Die Dujardin-Färbung ist eine Dreifachfärbung mit den Farbstoffen Acridinrot, Astrablau und Chrysoidin und damit der Wackerfärbung ähnlich (dort kommt statt des Chysoidins das Acriflavin zum Einsatz).
Die Färbung wurde 1964 von Emmanuel Dujardin entwickelt und im Mikrokosmos veröffentlicht (Eine neue Holz-Zellulose-Färbung. Mikrokosmos 53 (1964), Seite 94).
In Abwandlung des alten Rezeptes stellte Rolf-Dieter Müller von der MKB in 2009 die Dujardin-grün Färbung vor, in der das Astrablau durch Alciangrün ersetzt wird: "Bei der von mir geschätzten Dujardin-Färbung reicht es, wenn man statt in der Reihenfolge Astrablau – Acridinrot/Chrysoidin einfach die Vorfärbung mit Acidinrot/Chrysoidin beginnt und mit Alciangrün nachfärbt. Hierbei ist aber eine Nachfärbung mit Chrysoidin vorteilhaft, wenn man die schönen Orange- bis Rottöne herausarbeiten möchte."
Lavendelspross in Dujardin Grün


Ein Arbeitsblatt zur Dujardin-grün Färbung finden Sie im Download-Bereich.

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Hier im Sinne von Gesteinsdünnschliffen. Zur Erstellung eines Gesteinspräparates wird eine aus der Probe ausgesägte Scheibe auf einen Objektträger geklebt und dann auf eine Dicke von ca. 25 µm herunter geschliffen. Bei dieser geringen Dicke sind die meisten Minerale durchsichtig und der Schliff kann unter dem Mikroskop untersucht werden. Anhand charakteristischer Eigenschaften der Minerale im Polarisierten Licht könne diese bestimmt werden.
Auch aus anderen festen Materialien wie zum Beispiel Knochen lassen sich nach entsprechender Fixierung Dünnschliffe zur Analyse unter dem Mikroskop herstellen.
Eine kurze Beschreibung zur Herstellung von Gesteinsdünnschliffen im professionellen Umfeld finden Sie im Rahmen des Artikels zum Besuch des MKB im Gesteinslabor des Steinmann-Instituts der Universität Bonn.

Eosin ist ein Xanthenfarbstoff, der in zwei Ausprägungen als Eosin B (für brownish) und Eosin Y (für yellow) vorkommt. In der Botanik färbt er selektiv nicht verholzte Zellbestandteile. Seine Hauptanwendungsgebiete finden sich in Medizin und Zoologie, wo Eosin Y zum Färben von Zellen, u. a. im Blut (z.B. Hämatoxilin-Eosin-Färbung) genutzt wird, außerdem ist Eosin der Hauptfarbstoff in einigen roten Tinten. Eosin Y ist auch ein Bestandteil der BEN-Färbungen. 
Beispiel einer reinen Eosin-Färbung am Fruchtstiel einer Clementine:

Dr. H. Etzold stellte 1983 in der Zeitschrift Mikrokosmos erstmalig eine Mehrfachfärbung für botanische Schnitte mit den drei Farbstoffen Fuchsin, Safranin und Astrabau vor     (Etzold FSA). Die Farbstoffe werden in einem Gemisch angesetzt und somit reicht ein Färbegang zur Behandlung der Schnitte aus.
Mittlerweile existieren mehrere Weiterentwicklungen der ursprünglichen Rezeptur (Beispielbilder: Lavendelspross im Querschnitt):
Etzold FCA: hier ist das Safranin durch Chrysoidin ersetzt.

Schnitt von i.d.R. botanischem Probematerial mit einer Rasierklinge oder einem Mikrotommesser aus der freien Hand, also z.B. ohne Unterstützung durch ein Zylindermikrotom.

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Hilfsobjekte werden bei der Beobachtung im polarisierten Licht in den Strahlengang gebracht, um eine definierte Verschiebung der Wellenlänge im Strahlengang zwischen zwei gekreuzten Polfiltern zu erreichen. Beim klassischen Lambda-Schieber erscheint der normalerweise schwarze Hintergrund ohne Objekt dann in einem satten Rotton.
Ein Stück Acryl, z.B. von einer CD-Hülle ("Jewel Case"), kann ebenfalls genutzt werden, um eine solche Verschiebung zu erreichen. Es wird dazu z.B. einfach auf den unteren Polfilter im Strahlengang ("Polarisator") gelegt. Wegen der unterschiedlichen Dicke des Stücks erhält man jedoch keinen einheitlich gefärbten Hintergrund, sondern dieser leuchtet in allen Regenbogenfarben. 

Als klastisch (von gr. klastó - (ab)gebrochen) werden Sedimente bezeichnet, deren Material aus der mechanischen Zerstörung älterer Gesteine stammt.

In der Mikroskopie unterscheidet man unterschiedliche Kontrastverfahren, mit denen unterschiedliche Aspekte eines Präparates hervorgehoben oder überhaupt erst sichtbar gemacht werden können. Die wichtigsten Verfahren sind: Hellfeld, Dunkelfeld, Phasenkontrast, Polarisationskontrast und DIK (Differenzieller Interferenzkontrast).
Eine sehr gut gemachte Erläuterung der unterschiedlichen Kontrastverfahren findet sich im Rahmen von Christian Linkenhelds "Pfad durch die Lichtmikroskopie" in den Kapiteln 5 und 6 auf seiner Seite www.mikroskopie.de.

Ein Kryo-Bruch ist eine REM- (Rasterelektonenmikroskopische) Aufnahme einer Bruchstelle einer bei -196°C schockgefrohrenen pflanzlichen Probe. Der Bruch liefert ein nahezu dreidimensional wirkendes Bild des Probengewebes und erleichtert es dem Betrachter, sich ein Vorstellung von der Lage und Anordnung der Gewebestrukturen im Raum zu machen.

Eine Form der Riesenchromosomen, wie sie z.B. in den Hoden der männlichen Fruchtfliegen gefunden wird. Siehe auch Chromosomen.

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Als Mikroskop bezeichnet man ein optisches oder elektronisches Gerät, das es erlaubt, kleine Gegenstände unterhalb des Auflösungsvermögens des menschlichen Auges vergrößert zu betrachten. Neben den klassischen Lichtmikroskopen gibt es auch Elektronenmikroskope, die statt des sichtbaren Lichts einen Elektronenstrahl zur Abbildung des Untersuchungsobjektes verwenden.

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Fangnetz zum Fischen von Kleinlebewesen aus dem Wasser. Am Ende des kegelförmigen Netzes befindet sich in aller Regel ein Auffanggefäß, in dem sich der Fang ansammelt.
Die Maschenweite von Planktonnetzen liegt je nach Einsatzzweck zwischen 120 und 25 µm. Im allgemeinen lassen sich mit Netzen mit ca. 60 µm Maschenweite gute Ergebnisser erzielen.

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Pleochroismus wird die Mehrfarbigkeit von Mineralien bei Betrachtung aus verschiedenen Blickwinkeln genannt. Ursache ist die ungleiche Absorption des Lichtes bedingt durch die Kristallstruktur.
Dichroismus (Zweifarbigkeit) und Trichroismus (Dreifarbigkeit) sind Sonderformen des Pleochroismus.

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Als Polarisationsfilter bezeichnet man Filter, die nur für Licht einer bestimmten Schwingungsebene durchlässig sind. Im Lichtmikroskop kommen in der Regel zwei Polfilter zum Einsatz. Den unterhalb des Präparates z.B. im Filterhalter angebrachten bezeichnet man als Polarisator.  Der zweite oberhalb im Tubus untergebrachte wird Analysator genannt.
Bei gekreuzte Polfiltern stehe Polarisator und Analysator in einem Winkel von 90° zueinander. In dieser Konfiguration erreicht je nach Qualität der Filter nur noch wenig bis nahezu kein Licht das Okular, wenn sich kein optisch aktives Präparat im Strahlengang befindet.
Optisch aktive Präparate, wie z.B. Stärkekörner (Amyloplasten) in Pflanzenzellen oder bestimmte Mineralien, drehen die Schwingungsebene des sie passierenden Lichts und leuchten somit auch bei gekreuzten Polfiltern auf.
Die unterschiedliche Drehung der Schwingungsebene des durchtretenden Lichts dient bei der mikroskopischen Analyse von Gesteinsdünnschliffen unter Anderem zur Bestimmung der im Gestein enthaltenen Mineralien.

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Eine Form der Riesenchromosomen, wie sie z.B. in den Speicheldrüsen der Zuckmückenlarven gefunden wird. Siehe auch Chromosomen.

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Die SAC Färbung ist eine Dreifachfärbung für botanische Schnittpräparate mit den Farbstoffen Safranin, Astrablau und Chrysoidin. Sie wurde 2009 von Rolf-Dieter Müller erstmalig auf einem Treffen der MKB vorgestellt.
Beispiel einer SAC-Färbung an einem Lavendelspross:


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Als Sedimentgestein (Ablagerungsgestein oder Schichtgestein) bezeichnet man Gesteine, die sich aus Materialablagerungen an Land oder im Wasser gebildet haben. Als Ausgangsmaterialien kommen organische oder anorganische Überreste von Lebewesen, Erosionsschutt älterer Gesteine oder Ausfällungen aus Lösungen in Frage. 

Bei einer Simultanfärbung werden die unterschiedlichen Farbstoffe einer Färbung in einem festen Mischungsverhältnis gemeinsam angewendet. Im Vergleich zu einer Einzelfärbung mit den gleichen Farbstoffen entfallen dabei mehrere Färbe- und Spülgänge, eine Simultanfärbung ist also einfache in der Handhabung und weniger Zeitaufwändig. Diesem Vorteil steht eine schlechtere Anpassbarkeit der Färbung an unterschiedliche Proben gegenüber, da die Einwirkzeiten und Konzentrationen der Farbstoffe nicht getrennt variiert werden können. Ferner ist bei der Zusammenstellung einer solchen Färbung darauf zu achten, dass sich die eingesetzten Farbstoffe in der Mischung nicht gegenseitig behindern oder gar miteinander reagieren.
Bekannte Beispiele für Simultanfärbungen sind die Etzoldvarianten Etzold FCA und Etzold Grün nach Brügmann.

Vorstufe in der Entwicklung männlicher Samenzellen.

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Das Stacken ist eine Technik, bei der mittels geeigneter Programme wie z.B. Picolay oder Zerene Stacker eine Anzahl Aufnahmen mit identischem Bildausschnitt aber unterschiedlicher Schärfenebene so miteinander verrechnet werden, dass aus allen Bildern nur die kontraststärksten Bildanteile zu einem einzigen, insgesamt scharfen Bild verrechnet werden.  

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Von Robin Wacker entwickelte botanische Färbung auf der Basis der drei Farbstoffe Acridinrot, Acriflavin und Astrablau. Die Abkürzungen "W3A" oder "W-3A" beziehen sich auf den Nachnamen des Erfinders und die Anfangsbuchstaben der drei verwendeten Farbstoffe.

Erste Beschreibung in der Zeitschrift Mikrokosmos (Wacker, Robin: Eine neue und einfache Methode zur polychromatischen Anfärbung von Paraffinschnitten pflanzlicher Gewebe für Durchlicht- und Fluoreszenzmikroskopie. Mikrokosmos Heft 4/2006, Seite 210-212)

Eine Färbeanleitung zu Wackers W3A Färbung findet sich im Download-Bereich.

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Auf Basis der von Robin Wacker entwickelte W3A Färbung entstandene Gruppe von Simultanfärbungen von Rolf-Dieter Müller. W3Asim I enthält die "klassischen" Wacker-Farbstoffe Acridinrot, Acriflavin und Astrablau in der richtigen Zusammensetzung in einem Reagenz. bei der Färbung W3Asim II ist das Astrablau durch Alcianblau ersetzt. Während W3Asim I der W3A-Färbung recht nahe kommt, färbt W3Asim II lebendige, unverholzte Zellen blaugrün statt blau an.

Beispiel einer W3Asim II am Spross des Greiskrauts:


Erste Beschreibung auf der Seite des MKB im Artikel "Wacker für Alle - neue Simultanfärbungen auf Basis der W3A Färbung von Robin Wacker" von Rolf-Dieter Müller (2011).

Eine Färbeanleitung zu den W3Asim Färbung findet sich im Download-Bereich.

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Einfaches Gerät zum Erstellen von Dünnschnitten für die Durchlichtmikroskopie. Die Probe wird in einer Halterung gefasst und kann mit einer Mikrometerschraube in definierten Abschnitten vorgeschoben werden. Am oberen Ende befindet sich eine Glasplatte, über die ein Mikrotommesser oder ein Klingenhalter mit einer Einmalklinge zum sauberen Schnitt des Probematerials geführt werden kann.


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